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新聞中心 產(chǎn)品推薦 細胞快速消化的選型指南
細胞快速消化的選型指南
2023/09/22

酶 (enzyme),是由活細胞合成、在機體內行使催化功能的生物催化劑。目前已發(fā)現的酶約有萬(wàn)余種。日常實(shí)驗中,在貼壁細胞傳代前需要把細胞用消化試劑從培養容器表面解離出來(lái),細胞得以分離成單個(gè)懸液傳代至含新鮮培養基的新容器內。細胞消化的好,后續實(shí)驗就會(huì )進(jìn)行的更加順利;反之,則既浪費了時(shí)間又出不了成果。在細胞消化的方法中,酶消化法是最常用的方法,使用合適的消化酶則是細胞消化的關(guān)鍵步驟,我們整理了一份細胞消化類(lèi)產(chǎn)品選擇指南,方便您更好的選擇適合自己實(shí)驗的產(chǎn)品。


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常見(jiàn)用于細胞消化和酶切的類(lèi)別


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重組胰蛋白酶


重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶?,F代生物制藥的生產(chǎn)過(guò)程中,使用含有動(dòng)物源的原料,可能會(huì )將引起人畜共患病的潛在病毒源帶入產(chǎn)品中,如瘋牛病的BSE、口蹄疫病毒等,為了減少污染源,通過(guò)基因工程技術(shù)合成胰蛋白酶,解決了傳統使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來(lái)病毒污染的風(fēng)險。重組胰蛋白酶多用重組大腸桿菌或酵母系統重組表達并經(jīng)過(guò)多步層析純化獲得,重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,能特異性切割多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基中的羧基。因其無(wú)動(dòng)物源污染性,在醫藥開(kāi)發(fā)、生化研究領(lǐng)域中有著(zhù)廣泛的應用。


產(chǎn)品優(yōu)勢


● 不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑;

● 符合中國藥典2020版的標準;

● 精細化的過(guò)程控制,成就了重組胰蛋白酶的極高純度;

● 高比例β構型,以及超高比活性(≥3800USP units/mg pro.);

● 重組胰蛋白酶凍干粉在40℃可存放10天以上;

● 在2~8℃時(shí)可存放6個(gè)月以上,-15~-20℃時(shí)可存放24個(gè)月;


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重組賴(lài)氨酰內切酶

(雙專(zhuān)利加持原料)


重組賴(lài)氨酰內切酶屬于生物化學(xué)級別的基因工程酶,不含有其他雜蛋白酶(如Lys-N、Arg-C等絲氨酸類(lèi)蛋白酶),不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑。選用Achromobacter lyticus基因,克服大腸桿菌表達難題,選育高活性菌株,經(jīng)高密度發(fā)酵、分離純化和冷凍干燥而制成的凍干粉,可特異性切割賴(lài)氨酸殘基羧基端的肽鍵,具有天然賴(lài)氨酰內切酶相同的特異性和活力,且分為生化級和質(zhì)譜級兩種。


產(chǎn)品優(yōu)勢


● 純化全過(guò)程在溫和環(huán)境中完成,防止酶活損失;

● SDS-PAGE電泳,單一主條帶;

● 酶的比活性≥3.0AU/mg pro.;

● 酶切效率高,2AU酶即可完全酶切1g大多數融合蛋白;


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其他工具酶


重組腸激酶(Enterokinase, light chain)是一種高度專(zhuān)一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽,具有高度專(zhuān)一性,水解效率高的特點(diǎn),其活性可達11.5U /μl 。


重組Kex2蛋白酶屬于(E.C.3.4.21.61)屬于枯草桿菌蛋白酶家族,為酵母自身編碼的一種前體加工酶,Ca2+ 依賴(lài)型絲氨酸蛋白酶,能夠專(zhuān)一性地識別和切割 Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg 等雙堿性氨基酸的羧基端肽鍵,不同于Trypsin,該酶不能識別和切割單一堿性氨基酸即 Arg或 Lys 的羧基端肽鍵。


二者皆采用重組畢赤酵母高效達技術(shù),分離純化得到,是具有高純度、高活性特點(diǎn)。


產(chǎn)品優(yōu)勢


● 快速有效且溫和的細胞消化酶,對細胞損傷小,且能維持細胞膜完整性;

● 來(lái)源于酵母表達,無(wú)支原體或其他動(dòng)物病毒污染;

● 穩定性強,不受溫度、pH及血清組分的影響;

● 可用于多種類(lèi)型組織和細胞的分離等。


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使用說(shuō)明


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*注:兩個(gè)貨號代表不同級別,具體請聯(lián)系業(yè)務(wù)人員。


產(chǎn)品列表


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*具體參數以每批次COA文件為準


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